鱼粉蛋白含量测定 怎样测鱼粉中的蛋白

作者:饲界新视野 时间:2026-01-27 阅读:60

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鱼粉蛋白含量测定 怎样测鱼粉中的蛋白

本文目录

  1. 怎样测鱼粉中的蛋白
  2. 鱼粉含有多少蛋白量
  3. 鱼粉需要检测哪些项目

怎样测鱼粉中的蛋白

掌握微量凯氏法测定蛋白质总氮量的原理及操作技术。包括样品的消

化,蒸馏吸收及滴定与含氮量的计算。

二、原理:

凯氏定氮法:食品经加硫酸消化使蛋白质分解,其中氮素与硫酸化合成硫酸铵。然后加碱蒸馏使氨游离,用硼酸液吸收后,再用盐酸或硫酸滴定根据盐酸消耗量,再乘以一定的数值即为蛋白含量,其化学反应式如下。

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(1) 2NH2(CH2)2COOH+13H2S04(NH4)2S04+6C02+12S02+ 16H2

(2)(NH4)2SO4+2NAOH-----2NH2+2H2O+NA2SO4

(3)2NH3+4H3BO3----(NH4)2B4O7+5H2O

(4)(NH4)2B407+H2S04+5H20-(NH4)9SO4+4H2BO2

三、试剂与仪器:

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1、硫酸钾

2、硫酸铜

3、硫酸

4、2%硼酸溶液

5、40%氢氧化钠溶液

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6、混合指示剂:把溶解于95%乙醇的0.l%溴甲酚绿溶液10毫升和溶于95%乙醇的0.l%甲基红溶液2毫升混合而成.

7、0.OINHCL标准溶液或0.01N硫酸标准溶液.

8、凯氏微量定氮仪一套。

9、定氮瓶100m1或50ml一只。

10、三角瓶150ml 3只。

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11、量筒50ml、lOml、lOOml。

12、吸量管10ml只。

13、酸式滴定管1支。

14、容量瓶100毫升1只。

15、小漏斗1只。

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四、操作方法:

1、样品处理:精密称取0.2-2.0g固体样品或2-5g半固体样品或吸取10-20ml液体样品(约相当氮30-40mg),移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中,加入0.2g硫酸铜,3g硫酸钾及20毫升硫酸,稍摇匀后于瓶口放一小漏斗,将瓶以45度角斜支于有小孔的石棉网上,小火加热,待内容物全部炭化,泡沫完全停止后,加强火力,并保持瓶内液体微沸,至液体呈蓝绿色澄清透明后,再继续加热0.5小时。取下放冷,小心加20ml水,放冷后,移入100ml容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀备用。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸铵同一方法做试剂空白试验。

2、按图装好定氮装置,于水蒸气发生器内装水约2/3处加甲基红指示剂数滴及数毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入数粒玻璃珠以防暴沸,用调压器控制,加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。

3、想接收瓶内加入10ml 2%硼酸溶液及混合指示剂1滴,并使冷凝管的下端插入液面下,吸取10.0ml样品消化液由小玻璃杯流入反应室,并以10ml水洗涤小烧杯使流入反应室内,塞紧小玻璃杯的棒状玻璃塞。将10ml 40%氢氧化钠溶液倒入小玻璃杯,提起玻璃塞使其缓慢流入反应室,立即将玻璃盖塞紧,并加水于小玻璃杯以防漏气。夹紧螺旋夹,开始蒸馏,蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内,蒸馏5min。移动接收瓶,使冷凝管下端离开液皿,再蒸馏1min,然后用少量水冲洗冷凝管下端外部。取下接收瓶,以0.01N硫酸或0.01N盐酸标准溶液定至灰色或蓝紫色为终点。

同时吸取10.0ml试剂空白消化液按3操作。

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计算:

X=((V1-V2)*N*0.014)/( m*(10/100))+F*100

X:样品中蛋白质的含量,g;

V1:样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积,ml;

V2:试剂空白消耗硫酸或盐酸标准溶液的体积,ml;

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N:硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度;

0.014:1N硫酸或盐酸标准溶液1ml相当于氮克数;

m:样品的质量(体积),g(ml);

F:氮换算为蛋白质的系数。

注:

鱼粉蛋白含量测定 怎样测鱼粉中的蛋白

(1)样品应是均匀的,固体样品应预先研细混匀,液体样品应振摇或搅拌均匀。

(2)样品放入定氮瓶内时,不要沾附颈上,万一沾附可用少量水冲下,以免被检样消化不完全,结果偏低。

(3)消化时如不容易呈透明溶液,可将定氮瓶放冷后,慢慢加入30%过氧化氢2-3ml,促使氧化。

(4)在整个消化过程中,不要用强火,保持和缓的沸腾,使火力集中在凯氏瓶底部,以免附在壁上的蛋白质在无硫酸存在的情况下。使氮有损失。

(5)如硫酸缺少,过多的硫酸钾会引起氨的损失,这样会形成硫酸氢钾,而不与氨作用,因此当硫酸过多的被消耗或样品中脂肪含量过高时,要增加硫酸的量。

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(6)加入硫酸钾的作用为增加溶液的沸点,硫酸铜为催化剂,硫酸铜在蒸馏时作碱性反应的指示剂。

(7)混合指示剂在碱性溶液中呈绿色,在中性溶液中呈灰色,在酸性溶液中呈红色。如果没有溴甲酚绿,可单独使用0.1%甲基红乙醇溶液。

(8)氨是否完全蒸馏出来,可用PH试纸试馏出液是否为碱性。

(9)吸收叶也可以用0.01当量的酸代表硼酸,过剩的酸液用0.01N碱液滴定,计算时,A为试剂空白消耗碱液数,B为样品消耗碱液数,N为碱液浓度,其余均相同。

(10)以硼酸为氨的吸收液,可省去标定碱液的操作,且硼酸的体积要求并不严格,亦可免去用移液管,操作比较简便。

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(11)向蒸馏瓶中加入浓碱时,往往出现褐色沉淀物,这是由于分解促进碱与加入的硫酸铜反应,生成氢氧化铜,经加热后又分解生成氧化铜的沉淀。有时铜离子与氨作用,生成深兰色的结合物[Cu(NH3)4]++

鱼粉含有多少蛋白量

鱼粉用一种或多种鱼类为原料,经去油、脱水、粉碎加工后的高蛋白质饲料原料。全世界的鱼粉生产国主要有秘鲁、智利、日本、丹麦、美国、前苏联、挪威等,其中秘鲁与智利的出口量约占总贸易量的70%。据世界粮农组织(2026年)统计称,中国鱼粉年产量约120万吨,约占国内鱼粉消费总量的一半,主要生产地在山东省(约占国内鱼粉总产量的50%)、而浙江省约占25%,其次为河北、天津、福建、广西等省市。20世纪末期,我国每年大约进口70万吨鱼粉,约80%来自秘鲁,从智利进口量不足10%,此外从美国、日本、东南亚国家也有少量进口。虽然迄今鱼粉仍为重要的动物性蛋白质添加饲料,但是我国饲料工作者一直研究探索低鱼粉日粮和无鱼粉日粮,发酵豆粕是目前最好的替代产品。

1、有效能值鱼粉中不含纤维素等难于消化的物质,粗脂肪含量高,鱼粉的有效能值高,生产中以鱼粉为原料很容易配成高能量饲料。2、维生素鱼粉富含B族维生素,尤以维生素B12、B2含量高,还含有维生素A、D和维生素E等脂溶性维生素。3、矿物质鱼粉是良好的矿物质来源,钙、磷的含量很高,且比例适宜,所有磷都是可利用磷。鱼粉的含硒量很高,可达2mg/kg以上。 鱼粉中碘、锌、铁、硒的含量也很高,并含有适量的砷。4、未知生长因子鱼粉中含有促生长的未知因子,这种物质还没有提纯成化合物,这种物质可刺激动物生长发育。根据来源将鱼粉分为两种:一般将国内生产的鱼粉称国产鱼粉,进口的鱼粉统称进口鱼粉。显然,这种方类方法比较粗略,反映不出鱼粉的品质。根据鱼粉的品质国产鱼粉可以划分为三种鱼粉:全脂、半脱脂与全脱脂鱼粉;进口鱼粉根据工艺可划分为蒸汽干燥鱼粉与直火干燥鱼粉。

鱼粉需要检测哪些项目

1粗蛋白质的检验

粗蛋白质的含量是检验鱼粉质量的主要项目,国家行业标准以粗蛋白质含量作为衡量鱼粉质量和分等级的主要指标,也是首要的检测项目,按照GB/T6432[7]的规定测定粗蛋白质的准确度、精密度高,是经典的检测方法,但该方法耗费试剂,消解时间长,资料介绍的强碱直接蒸馏快速测定法、提高消化温度快速测定法、H2SO4-H2O2快速消解测定法都是可以运用于生产实践的测定方法。。

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2真蛋白质的检验

在生产实践中证明,光测定鱼粉粗蛋白质一项指标是不能确定其质量等级的,因为粗蛋白质含量是通过测定总氮的含量,再乘以6.25的系数而得出来的,它不能排除非蛋白质的干扰,关于非蛋白氮的概述和检测方法,许多资料都有介绍,从动物学的营养角度来说,测定真蛋白质的含量是较为重要的鱼粉质量好坏的另一个重要的定量指标是胃蛋白酶消化率,它表示可被胃蛋白酶分解的蛋白质与粗蛋白质之间的比例。

3其它定量分析项目的测定

作者认为鱼粉的质量分析项目除了上述三项营养成分指标外,根据定性判定情况还可测定总、粗纤维、磷、钙等几项指标。总铬含量的指标SC/T3501—1996标准作出了小于10mg/kg的规定,如果超过该项指标,则说明了鱼粉掺人了鞣革粉,作者在日常检验工作中发现过多起本地区市场销售鱼粉的含总铬量高达400—500mg/kg,这些鱼粉是明显掺假的劣质鱼粉。酸价的指标国家标准也做出了规定,一些腐烂变质的鱼粉其酸价都是比较高的。一般都会超过标准规定的7mg KOH/g的要求。对粗纤维的指标要求,国家标准没有作出规定,资料介绍鱼粉粗纤维含量为0.2%~1.5%,如果鱼粉掺入其它高蛋白质的植物原料,则粗纤维含量就会超过此含量范围。关于磷、钙的测定问题,有关专家认为某产地的鱼粉其磷、钙的含量都在一定的范围,并符合一定的比例,过高过低都属不正常的。

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标签: 鱼粉
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