本篇文章给大家谈谈饲料中粗蛋白的研究,以及如何检测家禽类饲料中的粗蛋白对应的知识点,文章可能有点长,但是希望大家可以阅读完,增长自己的知识,最重要的是希望对各位有所帮助,可以解决了您的问题,不要忘了收藏本站喔。

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凯氏法测定试样中的含氮量,即在催化剂作用下,用硫酸破坏有机物,使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出,用硼酸吸收后,再用酸滴定,测出氮含量,将结果乘以换算系数6.25,计算出粗蛋白含量。
2、试剂
2.1硫酸(GB 625):化学纯,含量为98%,无氮。
2.2混合催化剂:0.4g硫酸铜,5个结晶水(GB 665),6g硫酸钾(HG 3—920)或硫酸钠(HG 3—908),均为化学纯,磨碎混匀。 2.3氢氧化钠(GB 629):化学纯,40%水溶液(m/V)。 2.4硼酸(GB 628):化学纯,2%水溶液(m/V)。

2.5混合指示剂:甲基红(HG 3—958)0.1%乙醇溶液,溴甲酚绿(HG 3—1220)0.5%乙醇溶液,两溶液等体积混合,在阴凉处保存期为三个月。
2.6盐酸标准溶液:邻苯二甲酸氢钾法标定,按GB 601制备。 2.6.1盐酸标准溶液:c(HCl)=0.1mol/L。8.3mL盐酸(GB 622,分析纯),注入 1 000mL蒸馏水中。
2.6.2盐酸标准溶液:c(HCl)=0.02mol/L。1.67mL盐酸(GB 622,分析纯),注入1 000mL蒸馏水中。 2.7蔗糖(HG 3—1001):分析纯。 2.8硫酸铵(GB 1396):分析纯,干燥。
2.9硼酸吸收液:1%硼酸水溶液1 000mL,加入0.1%溴甲酚绿乙醇溶液10mL,0.1%甲基红乙醇溶液7mL,4%氢氧化钠水溶液0.5mL,混合,置阴凉处保存期为一个月(全自动程序用)。
3、仪器设备

3.1实验室用样品粉碎机或研钵。 3.2分样筛:孔径0.45mm(40目)。 3.3分析天平:感量0.0001g。 3.4消煮炉或电炉。
3.5滴定管:酸式,10、25mL。 3.6凯氏烧瓶:250mL。
3.7凯氏蒸馏装置:半微量水蒸气蒸馏式。 3.8锥形瓶:150、250mL。 3.9容量瓶:100mL。 3.10消煮管:250mL。
3.11定氮仪:以凯氏原理制造的各类型半自动。
4、试样的选取和制备

选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g,粉碎后全部通过40目筛,装于密封容器中,防止试样成分的变化。
5分析步骤
5.1.1试样的消煮
称取试样0.5~1g(含氮量5~80mg)准确至0.0002g,放入凯氏烧瓶中,加入6.4g混合催化剂,与试样混合均匀,再加入12mL硫酸和2粒玻璃珠,将凯氏烧瓶置于电炉上加热,开始小火,待样品焦化,泡沫消失后,再加强火力(360~410℃)直至呈透明的蓝绿色,然后再继续加热,至少2h。
5.1.2氨的蒸馏:

将试样消煮液冷却,加入20mL蒸馏水,转入100mL容量瓶中,冷却后用水稀释至刻度,摇匀,做为试样分解液。将半微量蒸馏装置的冷凝管末端浸入装有20mL硼酸吸收液和2滴混合指示剂的锥形瓶内。蒸汽发生器的水中应加入甲基红指示剂数滴,硫酸数滴,在蒸馏过程中保持此液为橙红色,否则需补加硫酸。准确移取试样分解液10~20mL注入蒸馏装置的反应室中,用少量蒸馏水冲洗进样入口,塞好入口玻璃塞,再加10mL氢氧化钠溶液,小心提起玻璃塞使之流入反应室,将玻璃塞塞好,且在入口处加水密封,防止漏气。蒸馏4min降下锥形瓶使冷凝管末端离开吸收液面,再蒸馏1min,用蒸馏水冲洗冷凝管末端,洗液均流入锥形瓶内,然后停止蒸馏。
5.1.2.3蒸馏步骤的检验
精确称取0.2g硫酸铵,代替试样,按5.1.2步骤进行操作,测得硫酸铵含氮量为21.19±0.2%,否则应检查加碱、蒸馏和滴定各步骤是否正确。
5.1.3滴定
用5.1.2.1或5.1.2.2法蒸馏后的吸收液立即用0.1mol/L或0.02mol/L(4.6.2)盐酸标准溶液滴定,溶液由蓝绿色变成灰红色为终点。

6、空白测定
称取蔗糖0.5g,代替试样,按第5章进行空白测定,消耗0.1mol/L盐酸标准溶液的体积不得超过0.2mL。消耗0.02mol/L盐酸标准溶液体积不得超过0.3mL。
7、分析结果的表述
7.1计算见下式:
粗蛋白质(%)=(V2-V1)·c×0.0140×6.25/(m×V'/V)×100式中:V2──滴定试样时所需标准酸溶液体积,mL; V1──滴定空白时所需标准酸溶液体积,mL; c──盐酸标准溶液浓度,mol/L; m──试样质量,g;

V──试样分解液总体积,mL; V──试样分解液蒸馏用体积,mL;
0.0140──与1.00mL盐酸标准溶液〔c(HCl)=1.000mol/L〕相当的、以克表示的氮的质量。
6.25──氮换算成蛋白质的平均系数。
7.2重复性
每个试样取两个平行样进行测定,以其算术平均值为结果。当粗蛋白质含量在25%以上时,允许相对偏差为1%。当粗蛋白含量在10%~25%之间时,允许相对偏差为2%。当粗蛋白质含量在10%以下时,允许相对偏差为3%。

饲料粗蛋白测定值高的原因可能有以下几种:
1.原料进厂时化验数据结果不准确,导致配方配比时实际产品出现差异,导致蛋白质含量过高。
2.原料库投料时,原料库投料人员误投某些原料,可能导致蛋白含量过高。
3.配料程序出现异常,导致过多的添加了某些原料物质或误用其他仓原料,从而导致蛋白含量过高。
4.配料时,一些需要人员手工添加的操作出现异常,也可能导致蛋白含量过高。

5.盐酸浓度、转移样品是否移取干净、混合指示剂的添加量以及装置的气密性等因素也可能影响粗蛋白的测定值。
为了解决这些问题,需要重新测试原料的数据,检查配料程序和人工操作,以及检查盐酸浓度和装置气密性等因素。
用5%预混料配置饲料,如预混料是买的现成的,它应该附上配方,否则是配不准确的,也无法配出的,因鱼粉、玉米等基础料中含有钙磷,预混料中也含有钙磷,这样就不准了。
配的方法:用鱼粉、玉米等基础料,共占95%,将各种料所占粗蛋白含量相加,使其达到17%,同时代谢能也要达到11.50兆焦/kg。
通过变动各种料用量比例,达到各项营养指标符合标准。如玉米含粗蛋白8.0%,用量为40%,能提供粗蛋白量为8.0%×40%=3.2%粗蛋白质量。

饲料原料中粗蛋白含量测定的影响因素:
1、粉碎
以豆粕为例:豆粕因为其生物结构特性:表皮较脆软易粉碎,但蛋白含量低;豆粕芯质地较硬难粉碎,蛋白含量高。故实际操作中会出现粉碎不均匀的现象。
2、样品称量
用分析天平准确称取0.2-0.5g(精确到0.0001g),以保证式样的含氮量在30-40mg。使滴定时盐酸滴定液的消耗体积保持在10-20ml之间,会较大程度上避免滴定液体积过小带来的误差,提高结果准确性。

浓缩饲料(粗蛋白含量≥40%),称量范围可在0.2-0.3g之间;配合饲料(粗蛋白含量≤20%),称量范围可在0.4-0.5g之间。
3、消化时间及温度
消化时间要达到4h,时间不充分会造成消化不完全,消化时间过长会造成蛋白的损失已及浪费能源。
要使消化温度达到420℃,使消化完全,温度低会造成消化不完全,温度过高会使氮气逸出影响结果。
扩展资料:

蒸馏时间对粗蛋白含量测定结果的影响:
把握好蒸馏时间,适宜的时间是5min。低于5min,结果蛋白质含量偏低;高于5min对结果没有明显改善,还会造成时间和资源的浪费。严格把控蒸馏时间,保证结果准确性。
加入碱的浓度:
选用40%的NaOH水溶液50ml,分5次加入,使其充分与试样溶液反应,从蓝绿色变成黑色。只有与NaOH溶液充分反应,才能使氨气充分逸出。
滴定原理:

用标准盐酸滴定,直到硼酸溶液恢复原来的氢离子浓度。滴定消耗的标准盐酸摩尔数即为NH3的摩尔数,通过计算即可得出总氮量。
在滴定过程中,滴定终点采用甲基红-溴甲酚绿混合指示剂颜色变化来判断。测定出的含氮量是样品的总氮量,包括有机氮和无机氮。
简单的说:饲料中的粗蛋白进入瘤胃以后,经瘤胃中微生物降解成多肽和氨基酸,部分多肽和氨基酸可以被直接利用吸收,部分被微生物用来继续降解成有机酸、氨和二氧化碳而合成微生物的菌体蛋白,这也是可被利用吸收的。
反刍动物可以利用氨的这一特性使得其饲料中可以添加一定量的尿素,而被利用合成蛋白质。
OK,关于饲料中粗蛋白的研究和如何检测家禽类饲料中的粗蛋白的内容到此结束了,希望对大家有所帮助。
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